NIBSC89/548介白素6采用的是雙抗體夾心酶聯免疫吸附法(ELISA)測定樣品中人白細胞介素-6(IL-6)的水平。向預先包被了人白細胞介素-6(IL-6)單克隆抗體的酶標孔中加入白細胞介素-6(IL-6),溫育;洗滌后,加入HRP標記過的白細胞介素-6(IL-6)抗體。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶,然后加入底物A、B,產生藍色,并在酸的作用下轉化成黃色。顏色的深淺與樣品中人白細胞介素-6(IL-6)的濃度呈正相關。
NIBSC89/548介白素6注意事項:
1.從2-8℃取出的試劑盒,在開啟試劑盒之前要室溫平衡至少30分鐘。酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差
3.建議所有標準品、樣本都做雙份檢測。如標本中待測物質含量過高,請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再按說明書操作進行測定,計算時請乘以總稀釋倍數(×n×5)。
4.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
5.為避免交叉污染,要避免重復使用手中的吸頭和封板膜。
6.不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
7.底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。
NIBSC89/548介白素6手工洗板方法:甩掉酶標板內的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標板朝下用力拍幾次;將稀釋后的洗滌液至少0.35ml注入孔內,浸泡1-2分鐘。根據需要,重復此過程數次。自動洗板:如果有自動洗板機,應在熟練使用后再用到正式實驗過程中。